AAV标准品(完整衣壳)

FDA和中国监管机构都要求对于基因治疗产品需要进行充分的表征。重组腺相关病毒rAAV 是一种广泛用于研究和临床应用的基因递送工具,对于AAV的表征和质控十分依赖于AAV标准品。因此经充分表征的AAV标准品是基因治疗产品研发和质控过程中的必备利器和保证。Charles River可以提供AAV1、AAV2、AAV5、AAV6、AAV8和AAV9血清型的AAV标准品(完整衣壳)。

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AAV标准品(完整衣壳)特点及产品信息

特点:

  • 充分表征:病毒基因组滴度、总病毒颗粒滴度和完整衣壳/空衣壳比
  • 高百分比的完整衣壳:56%~82%的完整衣壳
  • 高载体基因组浓度:1.8~8.0x10^11 GC/mL
  • 准确的完整衣壳/空衣壳比:经TEM分析
  • 广泛的分析:银染、ELISA、TEM、生物负荷、支原体和内毒素
  • 可用的AAV血清型-AAV1、AAV2、AAV5、AAV6、AAV8和AAV9
 


AAV标准品(完整衣壳)产品列表

货号# 产品描述 血清型
RS-AAV1-FL AAV1 reference materials (full capsids), 3.42x10^11GC/mL, 100 uL AAV1
RS-AAV2-FL AAV2 reference materials (full capsids), 1.03x10^11GC/mL, 100 uL AAV2
RS-AAV5-FL AAV5 reference materials (full capsids), 1.94x10^11GC/mL, 100 uL AAV5
RS-AAV6-FL AAV6 reference materials (full capsids), 2.56x10^11GC/mL, 100 uL AAV6
RS-AAV8-FL AAV8 reference materials (full capsids), 3.53x10^11GC/mL, 100 uL AAV8
RS-AAV9-FL AAV9 reference materials (full capsids), 2.18x10^11GC/mL, 100 uL AAV9


充分表征的AAV标准品(完整衣壳)

血清型特异性AAV标准品是使用无辅助病毒法,三质粒瞬时转染制备的。通过超速离心分离完整的衣壳,然后进行色谱纯化。使用基于分子的方法和透射电子显微镜(TEM)对病毒颗粒进行分析,以对病毒载体进行充分的表征,包括滴度定量和完整衣壳/空衣壳比。AAV标准品内的是CM基因负载是CMV-GFP。

AAV标准品(完整衣壳)表征:鉴别和纯度、每毫升病毒颗粒、每毫升载体基因组以及完整衣壳/空衣壳比。每种血清型AAV标准品的每批次从几千管到数万管不等。

AAV标准品(完整衣壳)TEM分析

图1。纯化的AAV9标准品的TEM(透射电子显微镜)图像。完整的衣壳显示为白色球体(白色箭头),而空的衣壳则显示为中心有黑点的球体(黑色箭头)。

银染分析AAV标准品(完整衣壳)的纯度

图2。AAV标准品(完整衣壳)的银染。将AAV标准品上样在Bis-Tris SDS-PAGE凝胶上。用银染法检测蛋白质。

AAV标准品(完整衣壳)的稳定性研究

AAV标准品的稳定性已通过一项独立的稳定性研究得到证明(rAAV, 3E+12 GC/mL)。AAV载体在-80℃下储存2年。通过qPCR和ELISA测定,病毒基因组滴度和总病毒颗粒滴度没有变化。

AAV标准品(完整衣壳)的稳定性研究将以持续的方式进行。qPCR测定将在-80℃储存后的3个月、6个月和之后每年进行一次。

AAV标准品(完整衣壳)的应用

  • 表征良好的AAV标准品(完整衣壳)可用于rAAV的表征和内部标准品的校准。
  • 作为qPCR滴度测定的标准品
  • 用于完整衣壳/空衣壳表征的对照品/标准品
  • 内部标准品的校准依据

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